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近年来，[[基因]]分析和[[基因工程]]技术有了革命性的突破，这主要归功于[[聚合酶链反应]]（polymerase chain reaction,PCR）的发展和应用。应用PCR技术可以使特定的基因或[[DNA]]片段在短短的2-3小时内体外[[扩增]]数十万至百万倍。扩增的片段可以直接通过电泳观察，也可用于进一步的分析。这样，少量的单拷贝基因不需通过[[同位素]]提高其敏感性来观察，而通过扩增至百万倍后直接观察到，而且原先需要一、二周才能作出的诊断可以缩短至数小时。PCR反应的原理如图13-7。

{{图片|gv215qx6.jpg|PCR原理示意图黑色线代表[[引物]]}}

图13-7 PCR原理示意图黑色线代表引物

由图可见，首先应按照欲检测的DNA的5’和3’端的[[碱基顺序]]各合成一段长约17-20余个[[碱基]]的[[寡核苷酸]]作为引物（primer），其次是将待检测的DNA变性后，加入四种[[单核苷酸]]（dNTP）、引物和耐热[[聚合酶]]。在较低的温度，引物将与待扩增的DNA链[[复性]]结合，然后的聚合酶的作用下，利用溶液中的[[核苷酸]]原料，不断延伸合成新互补链，这样，一条DNA双链就变成了两条双链。若继续按照变性（92－95℃）→复性（40－60℃）→[[引物延伸]]（65－72℃）的顺序循环20至40个周期，就可以得到大量的DNA片段。理论上循环20周期可使DNA扩增2n，即100余万倍。PCR反应特异性强，灵敏度高，极微量的DNA即可作为扩增的模板得到大量的扩增片段。[[毛发]]、血痕，甚至单个[[细胞]]的DNA即可供PCR扩增之用。因此它用于[[病原体]]DNA的检查、[[肿瘤]]残留细胞的检出、罪犯或个体[[遗传]]物质的鉴定以及[[遗传病]]的[[基因诊断]]等。

目前已可对一系列的遗传病进行PCR诊断。如果[[疾病]]是由基因缺失引起的（如α地贫），则在缺失两端设计一对引物进行扩增，就不会得到扩增产物或只能得到缩短了的扩增产物。如果疾病是由[[点突变]]引起的，而[[突变]]的位置和性质已知，则在设计引物时使之包括突变部位，由于突变后的碱基不配对，结果无扩增片段；或者在引物设计时于其3’端设计一个错误的核苷酸，使之与突变了的核苷酸配对，其结果是正常引物不能扩增，而用错误的引物能扩增，从而可对突变的存在作出判断。

PCR技术目前有许多新的发展，用途日益扩大。例如，可用[[RNA]]为模板经过[[逆转录]]再行扩增的RT－PCR；改变两引物浓度，使其相差100倍，结果得到大量[[单链]]产物，称为不对称PCR，其单链产物可用于序列分析；在一个反应中加入多对引物同时检测多个部位的多重PCR等等。
==参看==
*[[聚合酶链反应]]
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